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数字PCR系统 - 生命科学研究 - 报价参数

发布时间:2017/12/14 点击量:

数字PCR系统拥有二十多年PCR产品研发、生产经验的伯乐公司,多年来一直致力于为全球的生命科学研究人员提供富有创造力、高品质的研究设备。数字PCR系统Bio-Rad于2011年10月正式收购了美国QuantaLife公司,在此基础上正式推出"第三代PCR"--QX200微滴式数字PCR系统(QX200TMDroplet DigitalTM PCR)。

QX200 Droplet Digital PCR (ddPCR™) 系统可对靶 DNA 或 RNA 分子进行绝对定量分析,适用于 EvaGreen 或基于探针的数字 PCR 应用领域。

QX200 Droplet Digital数字PCR系统的优点

1、最准确、最灵敏的数字 PCR 解决方案,具有广泛的应用
2、灵活的数字 PCR 化学方法,已针对 TaqMan 水解探针和 EvaGreen 测定进行优化
3、灵活的测定设置,可通过扩展实现高度的灵敏性或较大的通量
4、简便而易用的工作流程,通量达 96 个样品
5、QX200 Droplet Digital 技术的微滴划分功能可减少扩增效率和 PCR 抑制剂的影响
6、便捷的测定设计,不需要标准曲线

"遗传与变异"是生生不息生物界永恒的主题。数字PCR系统其中遗传是基础,变异导致个体差异,也是整个生物种群进化的动力与源泉。就人类而言,随着人类基因组计划的完成与二代测序技术的普及,对整个基因组序列的了解已不是难题。但探知群体基因组水平上的变异仍是困难重重。遗传标记从最早期的RFLP(RestrictionFragment Length Polymorphis,限制性内切酶片段长度多态性)、STR(ShortTandemRepeat,短串联重复序列),直到SNP(SingleNucleotide Polymorphism,数字PCR系统单核苷酸多态性)和CNV(CopyNumberVariations,拷贝数变异)都致力于解开"变异"水平上的谜团,因为这些变异和发育、疾病、进化等等都息息相关。

数字PCR系统的应用领域

1、癌症生物标志研究和拷贝数变异分析 
以卓越的灵敏度和解析能力测量癌症突变的变异程度、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。

2、病原体检测 
采用极为精确的 QX200 系统对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。

3、新一代测序 
无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行绝对定量分析。

4、基因表达分析 
对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行可靠和可重复的检测。

5、环境监测 
使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。

6、食品检测 
采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。

微滴式数字PCR系统采用一种全新的方式进行核酸分子的定量,与传统PCR、定量PCR相比,其结果的精确度、准确性和灵敏度更佳。定量的结果不再依赖于Ct值,数字PCR系统直接给出靶序列的起始浓度,实现真正意义上的绝对定量。QX200微滴发生器(dropletgenerator)将含有核酸分子的反应体系形成成千上万个纳升级的微滴,其中每个微滴或不含待检核酸靶分子,或者含有一个至数个待检核酸靶分子,且每个微滴都作为一个独立的PCR反应器。经PCR扩增后,采用微滴分析仪(dropletreader)逐个对每个微滴进行检测,数字PCR系统有荧光信号的微滴判读为1,没有荧光信号的微滴判读为0(因此该技术被称为"数字PCR"),最终根据泊松分布原理以及阳性微滴的比例,分析软件可计算给出待检靶分子的浓度或拷贝数。
数字PCR系统 技术和工作流程

1.QX200 Droplet Digital PCR 系统由两个仪器(QX200 微滴生成仪和 QX200 微滴分析仪)及其相关的消耗品构成。
2.QX200 液滴生成仪用于将 PCR 反应生成 20,000 个纳升大小的液滴。在使用热循环仪进行 PCR 后。
3.QX200 微滴分析仪将逐个分析每个样品中的液滴。微滴被吸入后,管路将分解乳化的液滴,并使它们依次通过一个双色光学检测系统。
4.每次运行最多可处理 96 个样品。系统将计算阳性和阴性微滴的数量,数字PCR系统从而以数字格式对靶 DNA 进行绝对定量分析。
5.对于经过 PCR 的液滴,还可以提取扩增的产品以用于下游环节,例如测序或克隆。

由于能够确定待检靶分子的绝对数目,数字PCR系统因此QX200微滴式数字PCR特别适合如下应用:拷贝数变异、突变检测和基因相对表达研究等,并对遗传病、癌症、传染病的研究提供了一种全新的技术思路与手段。

 




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