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仪器资料

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[色谱世界]液相色谱词条注释

发布时间:2017/10/30 点击量:
液相色谱词条正文
  活性氧化铝 activated aluminium oxide 经化学处理后,其表面存在大量活性羟基的氧化铝微粒。它可用作吸附色谱和离子色谱的固定相。
  极性键合相 polar bonded phase 硅胶表面键合了极性有机基团的固定相。常见的极性有机基团有氨基、二氨基、二甲胺基、氰基、醚基和二醇基等。
  非极性键合相non-polar bonded phase 硅胶表面键合了非极性有机基团烃基硅烷的固定相。常见的烃基有丙基、己基、辛基、十六烷基、十八烷基和苯基,其中以十八烷基键合相(简称ODS或C18)应用最广泛。
  活性硅胶 activated silica gel  经化学处理后,其表面存在大量活性硅醇基(硅羟基)的硅胶微粒。它是吸附色谱中最常用的吸附固定相。
  活性中心 active center  对于液相色谱固定相而言,固定相表面直接与溶质分子产生相互作用的活性基团或吸附点。其含义与活性部位近似。
  活性部位 active site  又称活性点,对于液相色谱吸附固定相而言,固定相表面直接与溶质分子产生吸附作用的位置。其含义与活性中心近似。
  干凝胶 xerogel  硅酸在常温下脱水得到的水凝胶在高温(140℃以上)下进一步缩合得到的产物。液相色谱中用作固定相的硅胶是干凝胶,不过,其制备主要采用有机硅水解新工艺。
  吸附剂 adsorbing material  表面具有吸附活性部位的固体微粒。如硅胶和氧化铝微粒。吸附剂可以选择性地吸附不同类型有机化合物,在液相色谱中可用来作固定相。
  吸附剂活性 adsorbent activity  指吸附剂吸附其他物质分子的能力。吸附剂表面的吸附位点越多,吸附活性越强。
  吸附柱 adsorption column  以固体吸附剂作填料的色谱柱。是液固吸附色谱中典型的固定相,如硅胶柱和氧化铝柱。
  吸附色谱法 adsorption chromatography  以吸附剂作固定相,基于溶质在固定相活性表面的吸附亲和力达到分离的液相色谱方法。
  封尾 endcapping  用氯化三甲基硅烷等试剂与硅胶表面的残留硅醇基反应,将残留硅醇基封锁起来的化学处理过程。经封尾处理的硅胶基质固定相减小了溶质与固定相之间的次级相互作用,使分离效果有明显改善。
  亲和色谱法 affinity chromatography  以共价键将具有生物活性的配位体(如酶、辅酶、抗体、激素等)结合到不溶性固体基质(载体)上作固定相,利用蛋白质或生物大分子等样品与固定相上生物活性配位体之间的特异亲和力进行分离的液相色谱方法。亲和色谱主要用于蛋白质和生物活性物质的分离与制备。
  氧化铝色谱法 alumina chromatography  以活性氧化铝微粒为固定相的吸附色谱方法。
  纵向扩散 longitudinal diffusion  又称轴向扩散,在色谱过程中,指溶质分子在移动方向上向前和向后的扩散。它是由浓度梯度所引起,样品从柱入口加入,样品带像一个塞子随流动相向前推进,由于存在浓度梯度,塞子必然会自发地向前和向后扩散,从而引起谱的带展宽。
  涡流扩散 eddy diffusion  在色谱过程中,指溶质分子在前进过程中形成的类似于“涡流”的紊乱流动。当溶质随流动相流向色谱柱出口时,溶质和流动相受到填料颗粒的阻力,不断改变流动方向,致使同一溶质的不同分子在通过填料的过程中所走的路径不一样,所取路径最长和最短的溶质分子流出色谱柱的时间相差越大,则导致色谱峰的展宽越严重。
  残余硅醇基 residual silanol  又称残余硅羟基,是硅胶基质固定相在进行表面改性和修饰处理时,没有与功能基分子反应的硅醇基(硅羟基)。它也能与溶质分子相互作用(次级相互作用),引起溶质的保留。在很多情况下,残留硅醇基的作用会对目标分离产生不利影响。
  二元溶剂体系 dual solvent system  在液相色谱中,由两种不同极性溶剂的混合溶液作流动相的体系。根据分离的需要,可以选择不同的溶剂或两种溶剂的不同比例配制出合适极性的流动相。在液相色谱中,二元溶剂体系甚至多元溶剂体系经常使用。
  生物特异性柱 biospecific column  对生物活性成分具有特殊吸附作用的色谱柱。是将具有生物活性的配位体(如酶、辅酶、抗体、激素等)以共价键结合到不溶性固体基质上制备而成的,蛋白质或生物大分子等生物活性物质因与生物活性配位体之间的特异亲和力而选择地被吸附。在亲和色谱中使用的就是这类色谱柱。
  键合固定相 bonded stationary phase  又称化学键合固定相,是指通过化学反应将固定相(功能分子)键合到基质表面后得到的色谱固定相。键合固定相耐高温和有机溶剂,是当今液相色谱中使用最广泛的色谱固定相。
  二维色谱法 two-dimensional chromatography  利用切换阀或多通阀转换,中间转向展开(平板色谱)等手段,使样品同时或先后在两个不同色谱体系上进行分离的色谱方法。
  化学键合相色谱 bonded phase chromatography 又称键合相色谱或化学键合固定相色谱,指采用键合固定相的液相色谱方法。它是目前应用最广泛的液相色谱方法。
  手性固定相 chiral stationary phase  具有手性识别功能,能选择性地保留和分离手性异构体(对映体)的色谱固定相。可用作手性固定相的分子很多,如多糖类衍生物、肽、蛋白质、环糊精及其衍生物、手性二萘、手性尿素衍生物、奎宁和奎尼定衍生物、手性冠醚等等。含肽或蛋白质基团的手性固定相是把蛋白质、酶和抗体等生物大分子键合到硅胶基质上制得,用来分离生物、医药和临床等方面的手性异构体。
  柱色谱法 column chromatography  将色谱填料装填在色谱柱管内作固定相的色谱方法。根据色谱柱的尺寸、结构和制作方法的不同,又可分为填充柱色谱和毛细管柱色谱。
  柱压 column pressure  又称柱前压或柱入口压力,是色谱柱填充床阻碍流动相的流动,在柱前形成的压力。色谱仪工作时,在泵单元或控制单元上显示当前柱压。不同年代和不同国家生产的色谱仪的柱压表示单位不尽相同,通常有巴(bar)、千克力每平方厘米(kgf/cm2)和大气压(atm)。(注:1bar=105Pa,1kgf/cm2=9.807?104Pa,1atm=101325Pa)
  柱流失 column bleeding 指色谱固定相的功能层或功能基在使用过程中逐渐脱落和流失的现象。柱流失使色谱柱的性能不稳定和使用寿命缩短。
  柱清洗 column cleaning 将使用过程中沾污的色谱固定相用适当的溶剂进行冲洗的处理过程。如固定相上吸附上强保留物质后需用强的溶剂冲洗。
  柱再生 column regeneration 指将使用后性能有所下降的色谱柱通过适当的方法使其性能得以恢复的处理过程。如离子交换色谱柱长期放置会因树脂收缩导致性能降低,可通过用合适流动相溶液慢慢浸润的方法加以再生。柱再生必须根据柱填料性质和使用条件,采用适当的再生方法。
  溶解度参数 solubility parameter 是衡量溶剂极性的一种尺度。一个给定液体的总溶解度参数值决定于纯液体中色散相互作用、偶极相互作用和氢键相互作用三个参数的总和。对于某一特定样品类型,三个参数中的任何一个都可能是溶剂强度的较好度量。
  衍生化法 derivatization method  在色谱分析中,为了使某种(或某类)物质易于检测或易于保留,将被测物与一种试剂(衍生化试剂)反应后使之转变成希望的可检测或可保留化合物。如氨基酸的HPLC分析,通常需要用具有紫外或荧光性质的衍生化试剂将氨基酸衍生成可进行紫外或荧光检测的形式。又如用EDTA等配位体作衍生化试剂可以将过渡金属离子转变成配阴离子而在阴离子交换柱上分离。
  溶剂强度 solvent strength 在液相色谱中,指有机溶剂对样品的洗脱能力。它是描述溶剂色谱性能的主要指标,目前尚无统一标准定量描述不同类型液相色谱体系中的溶剂强度,通常用相对极性和溶解度参数等作为溶剂强度指标。
  双柱色谱法 dual column chromatography  当采用单一色谱柱无法分离样品中的待测组分时,就将两根不同性质的色谱柱串联或者并联起来使用,以实现难分离组分的分离。
  柱流出物 (column) effluent 在液相色谱中,指从色谱柱流出的包含了溶质的流动相溶液。柱流出物被导入检测器进行检测。
  洗脱强度 eluting power 又称洗脱能力,在色谱分析中,指流动相洗脱溶质组分的能力。
  手性试剂 chiral reagent 具有手性识别能力的有机试剂。它与手性对映体中的D构型体和L构型体反应生成的化合物具有色谱差异性,能采用液相色谱拆分它们。例如,在流动相中加入手性试剂,它与手性对映体的D构型体和L构型体反应生成的化合物与流动相和/或固定相的作用力发生差别,于是在非手性固定相上也能得到分离。
  溶剂极性参数 solvent polarity parameter 是衡量溶剂极性的一种尺度。它是基于溶解度数据导出的,在分配色谱中,溶质的保留决定于它在两相间中的溶解度,因此,溶剂极性参数可以较准确地度量分配色谱体系的溶剂强度。
  径向流动色谱  radial flow chromatography 采用特制的径流柱,使样品在色谱柱上沿纵向移动而达到分离目的的一种色谱模式。其特点是进样面积较大可提高样品处理量,有利于制备;同时因其柱短,可使生物活性样品在很短的时间内通过色谱固定相,从而保证生物样品不失活,在生物制备领域具有较好的应用前景。
  柱外效应 extra-column effect 由色谱进样系统、连接管路、检测器以及其他色谱柱之外的各种因素所引起的谱带展宽效应。在气相色谱中,由于柱有效体积占色谱流路系统总体积的比例很大,柱外效应比较小。而在液相色谱中,柱有效体积占色谱流路系统总体积的比例小,且溶质在液相中的扩散系数小,所以,柱外效应比较严重。
  轴向扩散 longitudinal diffusion  又称纵向扩散。?参见“纵向扩散”
  凝胶色谱法 gel chromatography 又称体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等,是以化学惰性的多孔性物质作固定相,溶质分子不是与固定相发生相互作用,而是受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱,不能被分离。比固定相孔径小的分子才能进入孔内而产生保留,溶质分子体积越小,进入固定相孔内的机率越大,于是在固定相中停留(保留)的时间也就越长。凝胶色谱法主要用于有机高分子化合物的分离和分子量分布的测定。
  凝胶柱 gel column 是以凝胶性填料填充的用于凝胶色谱分离的色谱柱。凝胶按化学组成可分为有机和无机凝胶,按机械强度可分为硬质和软质凝胶。
  凝胶过滤色谱 gel filtration chromatography, GFC  又称水系凝胶色谱,是以水或缓冲溶液作流动相的凝胶色谱。水溶性高分子化合物的分离采用这种体系。
  凝胶渗透色谱 gel permeation chromatography, GPC  又称非水系凝胶色谱或亲脂凝胶色谱,是以能溶解非交联和非凝胶型聚乙烯以及其他高分子的有机溶剂作流动相的凝胶色谱。主要适合于非水溶性(脂溶性)高分子的分离。
  梯度液相色谱 gradient liquid chromatography,采用梯度洗脱方式的液相色谱。液相色谱中的梯度洗脱主要是流动相强度梯度,即在淋洗过程中,通过改变流动相的组成或浓度使流动相的强度随时间连续增强(线性梯度)或间断增强(非线性梯度或阶式梯度)。
  硬(质)凝胶 hard gel 指机械强度高、耐高压的凝胶填料。常见硬凝胶有硅胶和多孔玻璃,适合于在高压下操作的液相色谱分析。
  高效液相色谱法 high performance liquid chromatography,HPLC 又称高压液相色谱法或高速液相色谱法,是指具有操作简便、分离速度快、分离效率高和检测灵敏度高等优良性能的液相色谱体系。液相色谱法早在1903年就由俄国植物学家Tswett发明,但早期的液相色谱法(古典液相色谱)柱效低、分离时间长,难以解决复杂样品的分离。到了20世纪60年代中后期,粒度小而均匀、传质速率快的色谱填料相继出现,使柱效显著提高,高压输液泵的使用解决了流动相流速慢的问题。从此液相色谱有了飞跃的发展,为区别于古典液相色谱法而称高效液相色谱法。HPLC几乎可以分离和分析任何物质,是最有效和应用最广泛的分离分析技术。
  高效柱 high performance column 指具有分离效率高、使用寿命长、耐高压、耐溶剂和性能稳定等优良性能的色谱柱。
  疏水作用色谱 hydrophobic interaction chromatography 采用具有适度疏水性的填料,以含盐水溶液作流动相,借助于溶质与固定相间的疏水相互作用实现分离的色谱方法。其保留机理与反相色谱基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相强,多为低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色谱主要用于蛋白质的分离与纯化。
  水凝胶 hydragel 硅酸在常温下脱水得到的产物。
  工业色谱 industrial chromatography  又称流程色谱,是在工业生产流程中安装色谱仪进行在线检测,从而对生产工艺进行在线控制。在石油精炼、冶金、石化和化肥生产流程中经常采用。
  柱入口压力 column inlet pressure  又称柱前压或柱压。?参见“柱压”
  间断洗脱色谱法 interrupted-elution chromatography  用不同组成或不同浓度的淋洗液,不连续地分别洗脱保留在色谱柱上的不同性质的物质组分。在制备色谱中常采用间断洗脱法。
  反相高效液相色谱法 reversed phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC  由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系。它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,典型的流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。
  反相离子对色谱 reversed phase ion pair chromatography  指用适当的反离子与被测离子形成具有一定疏水性的离子对化合物后,采用反相高效液相色谱体系分离所形成的离子对化合物的方法。
  低容量柱 low capacity column  又称低负荷柱。?参见“低负荷柱”
  峰容量 peak capacity  对给定的色谱体系和操作条件,在一定的时间内,最多能从色谱柱中洗脱出达到足够分离度的色谱峰(组分)的个数。如果柱的分离效率高,所获得的色谱峰尖锐,则该柱的峰容量就大。因此,影响柱效的因素都将影响峰容量。
  激光色谱 laser chromatography  以激光的辐射压力为驱动力,将待分离组分(或物质颗粒)按几何尺寸大小予以分离的一种色谱分离技术。欲分离的粒子随流动相(粒子溶液本身)以一定的流速流经一个内径为200mm左右的毛细管,将一定功率的激光束聚焦于毛细管的出口(流动相流出口),激光束的入射方向与粒子在流动相中的流动方向相反,但都与毛细管同轴。这时,溶质粒子同时受到流动相的推动力和与之相反的激光束辐射压力的作用。由于溶质粒子的折光指数大于溶剂的折光指数,因此溶质粒子受激光辐射压力作用而聚焦于激光束的中心线上,当溶质粒子受到的激光辐射压力大于流动相推力时,溶质粒子就会发生反转并获得一定加速度,沿激光束中心线运动,直至所受到的流动相阻力与激光辐射压力相等时,溶质才会停留。因为不同几何尺寸的溶质粒子受到激光辐射的作用力不同,它们在毛细管中的停留位置也就不同,从而达到分离。可以用配有显微物镜的电视摄像机记录分离结果。激光色谱是1995年刚刚提出的新的色谱方法,尽管尚无商品仪器,但可预言其在生命科学领域将发挥重要作用,如分离高分子聚合物微球、生物细胞、生物大分子、肽、DNA、线粒体。从理论上讲,可以实现单个蛋白质分子的检测。
  配位体交换色谱 ligand exchange chromatography  以离子交换基团上结合了金属离子的离子交换树脂作固定相,利用预先结合在固定相金属离子周围的配位体和流动相中的被测配位体之间的交换反应,进行配位体分离分析的色谱方法。
  体积排斥理论 size exclusion theory  又称平衡排斥理论。?参见“平衡排斥理论”
  液相色谱法 liquid chromatography  以液体为流动相,以固体或液体为固定相的色谱方法。它包括柱液相色谱法和平板液相色谱法(纸色谱和薄层色谱),在不作特殊说明的情况下,通常指柱液相色谱。
  液晶固定相 liquid crystal stationary phase  对色谱分离起实质作用的功能基团为液晶分子的固定相。
  反冲洗 back wash  在对离子交换剂进行再生之前,由下至上对色谱柱进行水冲洗的操作。
  液-液色谱法 liquid-liquid chromatography  流动相和固定相都是液体的色谱方法。作为固定相的液体往往是通过吸附、氢键或范德华力永久地或动态平衡地附着在固体载体上。由于多数情况下,固定相液体都存在一定的流失,使色谱柱的稳定性受到一定影响,因此,其实际应用受到了限制。
  液-液分配色谱法 liquid-liquid partition chromatography  根据溶质在液体固定相中的溶解或吸附能力的不同,因而在两相间分配系数不同使溶质达到相互分离的色谱方法。
  液固色谱 liquid-solid chromatography  流动相为液体,而固定相为固体的色谱分离模式。液相色谱可按固定相的状态分为液液色谱和液固色谱两类。
  等度洗脱 isocratic elution  在一次色谱分离操作过程中,不改变流动相的组成和浓度,即以等强度流动相洗脱全部组分的方法。
  低负荷柱 low load column  又称低容量柱,只能承受较低样品量(溶质绝对量)的色谱柱。目前使用的高效分离柱的容量一般来说都比较低,因为低负荷柱的分离效率高,适合于进行多组分、低含量样品的分析。
  低温色谱 low temperature chromatography  在低温下操作的色谱方法。用于热稳定性差或需要在低温下才能维持活性的生物样品的分析。
  动态包覆 dynamic coating  又称动态涂渍或在位涂渍。?参见“动态涂渍”
  质量色谱 mass chromatography  在色谱-质谱分析过程中,以一定的时间间隔将“质谱”记忆在计算机中后,取出特定质量数的离子强度加以记录,得到色谱图的方法。
  吸附溶剂强度参数 adsorption solvent strength parameter  在给定的吸附剂上,溶剂的相对极性大小。它能较好地量度吸附色谱体系的溶剂强度。
  氨基键合相 amino-bonded phase  在硅胶基质表面键合上氨烷基作功能层的色谱固定相。如将3-氨基丙基硅烷与多孔硅胶反应,即可在硅胶表面结合上一层(单分子层)氨丙基。氨基键合相与酸性硅胶的色谱性能不同,它同时具有氢键给予体和接受体,对多功能基化合物的分离选择性高。氨基键合相可用作正相色谱、反相色谱和离子交换色谱的固定相。
  氰基键合相 cyano-bonded phase  在硅胶基质表面键合上氰烷基作功能层的色谱固定相。如将g-氰丙基硅烷或b-氰乙基硅烷与多孔硅胶反应,即可在硅胶表面结合上一层(单分子层)氰丙基或氰乙基。氰基为氢键接受体,具有中等极性,与硅胶的色谱选择性类似,但比硅胶保留值低。氰基键合相可用作正相色谱和反相色谱的固定相。
  十八烷基键合硅胶 octadecyl silane, ODS  又称C18,是在硅胶基质表面键合上非极性的十八烷基后得到的色谱固定相。它是键合固定相的典型代表,绝大多数反相液相色谱体系都采用该固定相。
  亲硅醇基效应 silanophilic interaction  指极性溶质在硅胶基质固定相上因静电作用或氢键作用而与硅胶表面残余硅醇基发生相互作用的现象。尽管溶质与功能基团的作用是主要的,但亲硅醇基效应对极性溶质的保留往往产生不可忽略的影响。
  化学色谱法 chemi-chromatography  基于化学反应差异的色谱方法。
  低压液相色谱 low-pressure liquid chromatography  通常指在蠕动泵所能达到的压力指标(如200千帕)下操作的液相色谱法。它类似于靠重力使溶剂自然渗透通过色谱柱的“经典”液相色谱。然而,因为使用了泵、进样阀和检测器,使整个操作连续化,还可实现自动梯度洗脱和馏分收集。在制备色谱中常用。通常使用玻璃或聚合物材料的柱管,因需用输液泵,故此分离系统比快速色谱复杂一些。
  平衡排斥理论 equilibrium exclusion theory  又称体积排斥理论,是凝胶色谱分离机理的一种理论模型。它认为溶质在分离过程中存在一个扩散平衡,因为溶质在流动相中的浓度大于在固定相孔隙内的浓度,因而溶质要从流动相中扩散或“渗透”到固定相孔隙内,并从孔隙中排出。该理论不考虑溶质在填料表面的吸附和其他作用力,认为渗透仅决定于分子体积大小。体积大于填料孔径的溶质分子不能渗透到孔内,很快(在排斥体积附近)流出色谱柱。体积比填料孔隙小很多的溶质分子可以自由进出所有孔隙,在固定相中停留时间最长。对于体积与填料孔隙相当的溶质分子,随分子体积增大,进出孔隙的自由度减小,因而保留减小。
  限制扩散理论 theory of restricted diffusion  是凝胶色谱分离机理的一种理论模型。它认为溶质的分离是基于不同尺寸的溶质分子在不同孔隙中扩散速度的差别,分子扩散速率是填料孔径和溶质分子半径的函数。比较大的溶质分子只能扩散到部分较大的孔隙中,因而保留值小;小分子不仅能扩散到大孔中,还能扩散到小孔中,所以其保留值大。限制扩散理论认为,溶质流经凝胶柱并没有在两相间达到平衡,所以其保留值存在流速依赖性。
  流动分离理论 separation by flow  是凝胶色谱分离机理的一种理论模型。它把凝胶填料内的孔隙设想成由许多平行的毛细管组成。毛细管的排除效应使体积大的分子不能进入管内,而在管外,流动相流速大于管内。在能进入管内的溶质分子中,较大的溶质分子被流速场集中到管子中心而加快移动,较小的溶质分子因处于管内壁附近而降低了移动速度。其结果是溶质按分子体积大小分离。
  微量色谱法 micro-chromatography  采用微型色谱柱和高灵敏检测器的色谱体系。为了与微型柱相匹配,要求色谱仪的各功能部件也相应小型化和微型化。微量色谱法的优点是适合于样品量很少的样品分析,使用的流动相溶剂少。
  轴向压缩柱 axial compression column  又称纵向压缩柱,是一种可在柱轴向加压的制备型色谱柱。其内径约8厘米,上端是柱盖,下方有一个可移动的活塞。先将填料从上端装入柱内,拧紧柱盖后,用压缩空气推动柱下方的活塞向上推压,将填料压紧。分离完毕,将柱盖打开,通过活塞将填料顶出,分段切割后,用溶剂萃取回收已分离的组分,填料可反复使用。
  圆形色谱法 circular chromatography  以圆形状物质为固定相,在其中心或中心附近的同心圆上负载样品,向固定相中心供给展开剂,使样品以同心圆的形状向周围展开的色谱方法。主要用于纸色谱和薄层色谱。
  全多孔硅胶 macro-reticular silica gel  表面布满大而深的孔隙的硅胶微粒。孔隙深度通常在10~100nm。其特点是比表面积大,通常在200~500m2/g。但传质阻力较大,柱效较低。因其制备工艺简单、成本低,在制备色谱中仍广泛使用。
  混合床柱 mixed bed column  也称混合填充柱,是用两种不同功能的色谱填料混合后填充而成的色谱柱。它可用于同时分离两类化合物,如阴离子交换剂和阳离子交换剂混合床柱可实现阴阳离子的同时分离。
  堆积硅珠 stacked silica bead  由毫微米粒径的二氧化硅微粒凝集而成的硅胶微珠。微珠粒径小(5~10mm),具有全多孔结构,但又不存在全多孔硅胶那样的深孔,传质阻力小,是高速和高效的液相色谱填料。
  混合溶剂 mixed solvent  两种或两种以上有机溶剂的混合溶液。在液相色谱中,为了调节流动相的洗脱强度,经常使用混合溶剂作流动相。
  动态涂渍 dynamic coating  又称在位涂渍或动态包覆,是在流动相中加入能起固定相作用的功能分子(改性剂),使其在载体填料和流动相间达到动态平衡,并形成功能层的一种固定相制备技术。
  柱渗透性 column permeability  表示流动相溶液通过填充了填料的色谱柱的难易程度,柱渗透性K°与柱压降DP、流动相流速F、流动相粘度h、柱长L和填料孔隙度f之间的关系如下:
  改性载体 modified support  以惰性物质微粒为基质,在其表面进行修饰、改造后得到的适合于不同分离目的的色谱固定相载体。这种载体有的可以直接用作固定相填料,但多数情况下是用作进一步制备色谱固定相的基体(基质或载体)。
  有机改进剂 organic modifier  为了改善色谱分离和因吸附造成的色谱峰拖尾,在以电解质水溶液为主体的流动相中加入的有机溶剂。
  智能色谱 chromatography with artificial intelligence  利用计算机技术将智能化的色谱软件与先进的硬件技术结合,使分析过程(色谱条件的选择和定性定量分析)实现全自动控制的色谱分析技术。
  淋洗色谱法 elution chromatography  又称冲洗法或洗提法,是指将样品加于柱的一端,流动相连续通过色谱固定相,使溶质按保留从弱到强的顺序依次从固定相上洗脱出来的方法。绝大多数色谱分析采用的是淋洗法。
  置换色谱法displacement chromatography  又称排代或顶替色谱法,是指流动相起置换剂(或顶替试剂)的作用,将保留在色谱固定相上的溶质置换下来的色谱方法。流动相与固定相的吸附或溶解能力比溶质强,溶质按在固定相上的吸附或溶解能力从弱到强的顺序依次洗脱出来。该方法适合于族分离,如石油产品中烷烃、烯烃、芳烃的分离。
  前沿色谱法frontal chromatography  又称迎头色谱法,是指以样品溶液为流动相,连续流经色谱柱,使样品组分达到分离的色谱方法。在固定相上吸附(保留)最弱的组分最先以纯物质流出,其次是保留第二弱和最弱的两个组分的混合物流出色谱柱,依次类推。该方法只适合于简单混合物的分离。
  梯度洗脱 gradient elution  为了在合理的时间内有效地同时分离弱保留和强保留组分,在洗脱过程中逐渐增加流动相流速、流动相强度或改变柱温的方法。在气相色谱中主要采用的是改变温度的程序升温法,而在液相色谱中温度的影响较小,主要采用的梯度洗脱是改变流动相强度的流动相梯度。
  分子吸附 molecular adsorption  样品以分子状态吸附在固定相表面。在液相色谱中,通常用来区别于样品以离子交换、分配等机理保留在固定相中。
  分子量检测器 molecular weight detector  直接或间接检测被测物分子量大小的检测器。在凝胶色谱中用于测定高分子化合物分子量大小和分子量分布,常用的分子量检测器是粘度检测器和光散射检测器。因为高分子溶液的粘度和其溶质微粒的光散射强度都与高分子化合物的分子大小有关。
  中压液相色谱 middle-pressure liquid chromatography  操作压力介于高压和低压液相色谱之间(如2~3兆帕)的液相色谱法。主要用于实验室和工业规模的生物样品制备。
  化合物形成色谱 compound-formation chromatography  基于固定相表面化合物的形成与分解过程的色谱方法。例如,亲和色谱就是一种化合物形成色谱。
  窄粒度分布 narrow particle size distribution  指微粒状物质粒径分布范围窄,即微粒大小比较均匀。在色谱法中,填料的粒度分布范围对色谱分离性能影响很大,粒度分布越窄,色谱分离效率越高。
  常压液相色谱法 common-pressure liquid chromatography  指在大气压力下靠重力使淋洗溶液自然渗透通过色谱柱的“经典”液相色谱法。这种液相色谱法在制备色谱中进行初步分离时还仍然使用。通常使用大粒径(如50mm)填料和长约100~150cm、内径约5~10cm的大尺寸玻璃柱。
  非吸附性载体 non-adsorptive support  用于非吸附机理的色谱填料。溶质在这种填料表面不是以吸附相互作用被保留,而是以其他机理(如分配、离子交换等等)保留。
  非水相色谱 nonaqueous phase chromatography  以不含水的有机溶剂作流动相的色谱体系。如以极性有机溶剂和非极性固定相组成的色谱体系称非水反相色谱。
  盐析色谱法 salting-out chromatography  以盐析作用为主要分离机理的液相色谱方法。固定相为离子交换树脂,流动相为无机盐水溶液,用于非电解质溶液的分离。为了避免固定相表面的离子交换作用,离子交换基团上的可交换离子(反离子)应与流动相中的离子相同。
  唐南排斥 Donnan exclusion  由于溶液中存在唐南膜平衡,电解质向离子交换树脂渗透时被排斥的现象。因为强酸性阳离子交换树脂的唐南排斥作用相当显著,所以在离子排斥色谱中通常采用强酸性阳离子交换树脂作固定相。
  荧光色谱法 fluorescence chromatography  采用荧光检测的色谱方法。如果被测物是荧光物质,则可以直接检测;如果被测物是非荧光物质,则可以在分离前(柱前衍生)或分离后(柱后衍生)使被测物质与荧光试剂反应转变成荧光物质后进行荧光检测。根据所采用的分离方法,可分荧光高效液相色谱法、荧光薄层色谱法、荧光纸色谱法等等。
  非极性固定相 non-polar stationary phase  对分离起实质性作用的固定相表面的功能分子为非极性化合物的固定相。非极性有机分子(如硅烷、冠醚)通过化学键合连接在固定相表面的为非极性键合固定相,通过吸附作用固定在固定相表面的为非极性包覆固定相。非极性固定相是液相色谱中应用最多的固定相。
  液相色谱-质谱仪 liquid chromatography-mass spectrometer  简称液质联用仪,是(高效)液相色谱仪与质谱仪的组合仪器。既可以将质谱仪看作液相色谱仪的检测器,也可以将液相色谱仪看作质谱仪的带在线样品预分离处理功能的进样装置。
  硅烷化载体 silanized support  基质表面通过硅烷化反应导入烷基链作功能基团的色谱填料,如C8柱、C18柱、苯基柱的填料就是典型的硅烷化载体。
  液相色谱-质谱分析法 liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS  简称液质联用,是(高效)液相色谱分离与质谱检测相结合的分析方法。该方法结合了液相色谱的高分离能力和质谱的定性能力,因此,适合于组成未知或无对照品的组分的分析,在生物医药等许多领域得到了应用。
  高效液相色谱-付里叶变换红外分析法 high performance liquid chromatography-Fourier transform infrared spectrometry, HPLC-FTIR   是高效液相色谱分离与付里叶变换红外相结合的分析方法。该方法适合于分析具有红外特征吸收基团的有机化合物。
  径向展开色谱 radial development chromatography  又称径向流动色谱。?参见“径向流动色谱”
  反应色谱 reaction chromatography  在色谱分离过程中或在分离前后有意识地使被测物发生某种化学反应,实现定性或组成分析目的的色谱方法。反应色谱技术可以用在各种色谱模式中,但主要是用在气相色谱、二维薄层色谱和裂解气相色谱中。
  顶替色谱法displacement chromatography  又称置换或排代色谱法。?参见“置换色谱法”
  快速色谱法 high-speed chromatography  采用短柱和简单的加压方法进行快速分离制备的(液相)色谱方法。色谱柱是一根尾端带活塞开关的玻璃柱,淋洗剂容器的出口端与柱顶端磨口相接,淋洗剂容器的上端与惰性气体(氮气)钢瓶相接,调节钢瓶出口压力给色谱柱以适当的压力。它与短柱色谱类似,只不过短柱色谱所用色谱柱可以是耐压的不锈钢柱管,可以采用各种加压方式(如中或高压),而快速色谱是利用实验室廉价易得的常规玻璃仪器和氮气源。
  间接光度(检测)色谱法 indirect photometric chromatography  采用间接光度检测技术检测无紫外吸收样品的液相色谱分析方法。一般情况下间接光度检测指的是间接紫外吸收检测。它是在流动相中加入有较强紫外吸收的试剂,这种紫外吸收试剂在离子色谱中称紫外洗脱试剂,在离子对色谱中称离子对探针,在普通液相色谱中称紫外显色试剂。间接光度检测在离子色谱中应用得最多。
  光声检测法 photoacoustic detection  利用光声效果的液相色谱检测方法。它以连续激光或脉冲激光作光源,当激光照射在样品上,样品吸收光能,在密封的光声池内,将一部分光能通过非辐射跃迁转变成热能,使样品温度升高,通过激光调制使样品温度以一定的频率升降,从而产生声波(热波)。微音器接收声波并将其转变成电信号。光声检测法的灵敏度比通常的紫外检测高约一个数量级,是一种新型的高灵敏度液相色谱检测法。
  体积排斥色谱 size exclusion chromatography, SEC  又称凝胶色谱?参见“凝胶色谱法”
  热透镜光谱检测法 heat lens absorbance detection  基于热透镜效应的液相色谱检测方法。它以连续激光或脉冲激光作光源,样品将吸收的光能通过非辐射跃迁转变成热能,使样品温度升高的同时也使样品的折射率发生变化,从激光束中心到激光束边沿形成一个折射率梯度,好象一个透镜,测定样品局部折射的变化即可检测到被测物质。与液相色谱中常用的直接测定流动相和样品折射率差的示差折光检测相比,热透镜光谱检测的灵敏度高两个数量级。
  迎头色谱法 frontal chromatography  又称前沿色谱法。?参见“前沿色谱法”
  离心逆流色谱 centrifugal counter-current chromatography, CCCC  在分离过程中涉及离心力作用的逆流色谱方法。旋转小室逆流色谱和液滴逆流色谱是靠重力作用的,其缺点是洗脱速度慢。如果根据流体力学原理,使分离柱管在绕仪器中心轴公转的同时也绕自身轴线自转,就可以加速溶质在两互不混溶溶剂相的分配。新开发的高速逆流色谱仪就是采用的同步行星式的运动方式。
  高压液相色谱法 high pressure liquid chromatography 又称高效液相色谱法。?参见“高效液相色谱法”
  停流进样 stop-flow injection  使色谱泵在停止状态下直接通过隔膜进样将样品注入色谱柱的一种进样操作方法。因为注射器隔膜进样法不能在高压下操作,所以预先将色谱泵停止工作,卸压后再进样,然后重新启动色谱泵进行分离和分析。停泵和重新启动泵往往会因隔膜的污染出现“鬼峰”,而且这种进样方式的保留时间的重复性不好。
  非线性色谱 non-linear chromatography  色谱信号(峰高或峰面积)的大小与进样量(样品浓度)不成线性关系的情况下进行的色谱过程。柱超载下的色谱过程就是非线性色谱过程。分析型色谱因需在线性范围内才能进行准确的定量分析,故应避免非线性色谱操作,而在制备色谱中则往往在柱超载的情况下进行非线性制备。
  分配色谱 partition chromatography  基于样品组分在固定相中的溶解度的不同而产生保留和分离的色谱模式。它包括液液分配色谱和液固分配色谱。
  填料 packing material  用作色谱固定相的材料。通常制备成5~10mm粒径的球形颗粒,并对其表面进行修饰和改造,以适合不同物质成分的分离。
  超临界流体萃取 supercritical fluid extract,SFE  以超临界流体(如超临界状态下的CO2)作萃取剂直接从固体和液体样品中萃取分离出某种或某类目标化合物的方法。其实验装置与超临界流体色谱仪类似,只是用萃取容器代替了色谱柱,在仪器最后有一个馏分收集器用于收集萃取出来的样品。SFE不使用有机溶剂(有时使用少量有机改进剂),产品易于纯化,污染小,在天然产物的分离制备中已有较多成功的应用实例。
  柱负载能力 column loadability  在色谱分析或制备中,一定色谱条件下允许的最大进样量(体积或质量)。它对于比较不同色谱体系的性能是有用的。
  pH值梯度洗脱 pH gradient elution  在液相色谱分离过程中改变流动相pH值,使分离得以改善的色谱分离操作技术。
  径向压缩柱 radial compression column  一种可在柱径向加压的制备型色谱柱。其结构是在一根约30厘米长、5厘米内径的塑料管内装上色谱填料,然后在其外层套上一根耐压不锈钢管,在塑料管和钢管的夹层内用水或压缩空气向柱管的径向施加压力,通过塑料管壁将填料压紧。
  孔径 pore diameter  多孔性材料上孔隙的大小(直径)。多孔性色谱固定相载体的孔径通常在数nm至数十nm。
  孔径分布 pore size distribution  指所有孔隙的孔径大小所分布的范围。对色谱填料而言,孔径分布范围越窄,色谱峰的展宽越小。
  孔结构 pore structure  指多孔材料上孔的空间形状(或深或浅,或直或曲)。对色谱填料而言,不同的孔结构对溶质扩散的影响是不一样的,孔结构的单一性越好,越有利于抑制色谱峰的展宽。
  多孔硅胶 porous silica gel  孔隙度高的硅胶微粒。通常分为表面多孔硅胶和全多孔硅胶。
  多孔载体 porous support  又称多孔基质,是具有良好孔隙性的色谱固定相基质。分表面多孔载体和全多孔载体。
  径向流动色谱 radial flow chromatography  又称径向展开色谱,是使用径流柱的一种色谱方式。多用于制备色谱。由于径流柱进样面积大和柱长短,可以大大提高制备量。同时,被分离物质在柱内滞留时间短,这对样品组成复杂,且含强吸附有机物的生物样品的分离制备非常有利。
  径流柱 radial flow column 又称径向柱,由两个同心圆筒构成,能使流动相带着样品沿柱的纵向移动的色谱柱。色谱填料装在圆筒的夹层中,圆筒的内外周边均固定有一层多孔滤膜,样品从圆筒的外周边加入,沿圆筒的径向流入中间的细管中,然后与检测器相连。径向柱进样面积大,等于圆筒外周边面积;柱长短,等于圆筒夹层厚度。
  多维色谱法 multi-dimensional chromatography  同时或先后利用多种色谱系统使样品达到满意分离的色谱方法。
  循环色谱法 recycling chromatography  通过多通切换阀将柱流出物全部或需要进一步分离的部分重新导入分离柱,在柱内循环分离的色谱技术。循环色谱法在不增加柱长和使用低效高容量填料的情况下可以获得较高的分离效率。循环色谱主要用于液相色谱制备,循环分离的效率和分离度决定于连续再循环的次数。
  手性流动相 chiral mobile phase  含有手性识别功能试剂的流动相。手性色谱除可采用手性识别固定相外,还可以采用在流动相中加入手性试剂的方法,手性试剂与待分离手性异构体反应生成的L体和R体衍生物的性质有差异,在非手性固定相中即可分离。如分离离子型对映体药物时,可以用含手性离子对试剂的流动相,在反相液相色谱柱上分离。
  反相柱 reversed phase column  在基质表面键合或包覆非极性有机分子所得到的非极性固定相柱。采用反相柱和极性流动相的液相色谱体系就是应用最广泛的反相高效液相色谱法。常见的反相柱有C18、C8和苯基柱。
  正相高效液相色谱法 normal phase high performance liquid chromatography, NP-HPLC  是由含极性有机基团的固定相和非极性(或弱极性)溶剂流动相所组成的色谱体系。其代表性的固定相是硅胶或改性硅胶,代表性的流动相是正己烷。早期的液相色谱中曾广泛采用这种体系。
  触角载体 tentacle supports  通过线性聚合的方式,在无机物或有机聚合物基质表面嫁接上呈“触角”状的柔性聚合物链的色谱填料。对分离起实质作用的功能基团分布在伸展的柔性长链上,避免了样品分子与固定相之间的多官能团相互作用所引起的生物聚合体的不可逆构象变化,样品分子在固定相和流动相之间的转移速率也大大加快,使色谱分辨率明显提高。触角通常是具有亲水基团的有机大分子,这种亲水性可以减小蛋白质分子与基质表面的相互作用,即减小了蛋白质的吸附。触角载体已被用于蛋白质、糖等生物大分子的分离与制备。
  金属作用色谱 metal interaction chromatography  又称固定金属离子亲和色谱,指结合在固定相表面螯合基团上的金属离子是溶质保留和分离的主要因素的色谱方法。它是亲和色谱的延伸,固定在螯合环中的金属离子可以有效地结合蛋白质、肽类等生物样品,在生物样品的分离与制备中得到了应用。
  样品预处理 sample pretreatment  根据分析方法的要求,在分析之前预先对样品进行适当的溶解、分离、纯化、浓缩等处理。样品预处理的方法很多,如溶剂萃取、过滤、超滤、离心、离子交换、固相萃取等等。
  手性色谱chiral chromatography  采用手性固定相或添加了手性试剂的流动相进行手性异构体(对映体)分离的色谱技术。液相色谱和气相色谱都可以进行手性异构体分离。它利用手性固定相或手性流动相中的手性试剂与被测手性异构体分子的空间和特异相互作用的差异,将对映体拆分开。手性色谱在生物和医药领域具有重要应用。
  半制备柱 semi-preparation column  用于实验室制备规模,比通常的制备柱尺寸小的色谱柱。通常内径为1~2厘米,柱长为25~50厘米。
  短柱色谱法 short column chromatography  使用比通常柱长短的色谱柱进行分离或制备的色谱方法。在相同色谱条件下,色谱柱越短分离效率则越低,但分离速度加快,适合组成简单的样品的快速分离或某个目标化合物的制备与纯化。
  疏溶剂理论 solvophobic theory  指完全或部分疏水性溶质分子受到极性溶剂的排斥而被烃类固定相吸引。它为处理反相高效液相色谱中的一些现象提供了理论构架,有助于考虑流动相性质和固定相的表面性能。也就是说,在反相高效液相色谱中,非极性溶质是因为与极性溶剂之间的斥力,而不是与固定相之间的微弱非极性作用力(色散力)而被固定相所保留。(与药物分析40疏溶剂作用理论重复,合并)
  实心载体 solid support  颗粒内部无孔隙的实心微球。用作色谱填料的载体(基质),它与流动相接触时不会产生溶胀,溶质不会在颗粒内扩散,可加快溶质在固定相中的传质速度,提高分离效率。
  固相扩散 solid diffusion  溶质从液固或气固界面向固相内部的传质过程。在色谱分离过程中,溶质在固相扩散中的阻力(传质阻力)是引起色谱谱带展宽的因素之一。
  疏溶剂色谱法 solvophobic chromatography  基于非极性溶质受极性溶剂排斥而被非极性固定相所保留的原理而实现分离的色谱方法,即现在通常所说的反相高效液相色谱法。
  表面多孔硅胶 superficially porous silica gel 又称薄壳型硅胶,内部为实心,仅在表面层具有良好多孔性的硅胶颗粒。通常是以直径30~40mm的球形玻璃实心核为基料,在其表面粘结上数百纳米粒径的硅胶(或氧化铝)细粉,然后在高温下烧结,使硅胶颗粒表面形成一层仅仅1~3mm厚的薄层。
  阶梯梯度 stagewise gradient 在某一时间点,直接从某一低强度的流动相改变为另一较高强度的流动相的梯度程序。
  线性梯度 linear gradient  在某一段时间内连续而均匀地增加流动相强度的梯度程序。
  无孔单分散填料 non-porous monodisperse packing  表面和内部都无孔隙的实心球颗粒。为了适应生物大分子分离的需要,Unger提出用1~3mm粒径的无孔小球作固定相,大分子溶质在无孔小球之间的空隙中通过,并与小球表面相互作用,实现生物大分子的快速分离。无孔小球的基质有硅胶、树脂和金属氧化物(如二氧化锆)。
  基质 substrate materials  又称载体或担体,通常制备成数mm至数十mm粒径的球形颗粒,它具有一定的刚性,能承受一定的压力,它对分离不起明显的作用,只是作为功能基团的载体。
  超临界流体 supercritical fluid  指高于临界压力和临界温度时的一种物质状态。它既不是气体,也不是液体,但它兼具气体的低粘度和液体的高密度以及介于气体和液体之间的较高扩散系数等特征。
  超临界流体色谱 supercritical fluid chromatography, SFC  以超临界流体作流动相,以固体吸附剂(如硅胶)或键合在载体(或毛细管壁)上的有机高分子聚合物作固定相的色谱方法。常用流动相为超临界状态下的CO2、氧化亚氮、乙烷、三氟甲烷等。CO2最常用,因为它的临界温度低(31℃)、临界压力适中(7.29MP)、无毒、便宜,但其缺点是极性太低,对一些极性化合物的溶解能力较差,所以,通常要用另一台输液泵往流动相中添加1~5%的甲醇等极性有机改性剂。SFC所用色谱柱既有液相色谱的填充柱,又有气相色谱的毛细管柱,但由于超临界流体的强溶解能力,所使用的毛细管填充柱的固定相必须进行交联。从理论上讲,SFC既可以象液相色谱一样分析高沸点和难挥发样品,也可象气相色谱一样分析挥发性成分。不过,超临界流体色谱更重要的应用是用来作分离和制备,即超临界流体萃取。
  表面多孔填料 superficially porous packing material  在实心玻璃微珠(20~50mm)的表面包覆一层约1mm厚的极细微粒硅胶(0.01~0.2mm)作基质的填料。固定相的功能分子是通过化学或机械方法结合在包覆层的微细颗粒表面。这种填料因表面积大而具有很高的分离效率。
  溶胀 swelling  在液相色谱中,指有机聚合物基质的填料在与流动相溶液接触后体积膨胀的现象。
  柱切换技术 column switching technique  在色谱系统中利用多通阀改变流动相流向,或改变分离柱与分离柱之间、分离柱与进样器或检测器之间的连接方式的技术。其应用包括样品预富集、分段切割、样品制备、溶剂选择和梯度洗脱、色谱柱选择、检测器选择、辅助流路的开闭等等。
  全多孔型填料 macro-reticular packing material  又称大孔填料,指基质颗粒上除分布有小孔(如孔径小于5nm)外,还有大孔(如孔径大于5nm,甚至达数十nm)的填料。常见全多孔填料有硅胶、氧化铝、多孔玻璃、多孔碳、有机多孔聚合物等。大孔的存在使溶质分子在填料粒子内的扩散速度加快。
  大孔填料 macro-reticular packing material  又称全多孔型填料。?参见“全多孔型填料”
  超声波脱气 ultrasonic degas  在液相色谱中,用超声波发生装置脱去流动相中溶解的小分子气体(氧气、二氧化碳等)。流动相溶液在配制过程中和放置期间会慢慢溶解气体,这些气体会影响色谱分离,使用前需进行脱气操作。
  流动相梯度 eluent gradient  在色谱分离过程中改变流动相的组成(溶剂极性、离子强度、pH值等)或改变淋洗剂浓度的梯度技术。
  柱前衍生化 pro-column derivatization  将被测物与衍生化试剂反应生成目标衍生物后,以此衍生物为样品进样至色谱柱中分离的方法。柱前衍生化要求衍生产物具有很好的稳定性和良好的色谱保留行为。
  柱后衍生化 post-column derivatization  使被测物在色谱柱上分离后,将柱流出物与衍生化试剂反应转变成易于检测的形式,即衍生化过程是在分离之后进行的。这是液相色谱中最常见的衍生化形式,例如可将被测物转变成具有紫外、可见光吸收或荧光发射的形式,以便于采用常用检测器检测。
  柱中衍生化 on-column derivatization  又称在柱衍生化,被测物与衍生化试剂的衍生化反应是在分离过程中完成的。通常是将衍生化试剂添加在流动相中,当被测物进样到色谱柱中接触流动相时,就会与衍生化试剂反应生成目标衍生物。柱中衍生化要求衍生化反应的速度很快,生成的衍生物具有很高的稳定性。
  包覆型填料 coated packing material  通过氢键、吸附或静电相互作用在表面多孔型或全多孔型载体的表面覆盖一层功能分子层制得的液相色谱填料。其载体也可以是表面功能基化的某类固定相,功能分子通常都是一些有机大分子化合物,如三甲基乙二醇、聚乙二醇、聚酰胺、冠醚、胆汁酸等。
  平板色谱 planar chromatography  指固定相呈平板状的液相色谱方法。包括以薄层板为固定相的薄层色谱和以色层纸为固定相的纸色谱。
  胶束液相色谱法 micellar liquid chromatography  以高于临界胶束浓度的表面活性剂(十二烷基硫酸钠)溶液代替有机溶剂水溶液做流动相的液相色谱方法。溶质在固定相和胶束相以及水相之间进行分配而达到分离。在水溶液中形成的胶束称正相胶束,可用于反相液相色谱分离模式;在非极性溶剂中形成的胶束称反相胶束,可用于正相液相色谱分离模式。这一方法于1979年由Armstrong提出后受到很多研究者的重视,目前的应用主要是采用反相胶束液相色谱分析环境和药物样品。
  干柱色谱法 dry-column chromatography  使用干燥填料柱进行分离制备的色谱方法。具体操作是先将干的吸附剂装入色谱柱中,同时将待分离样品配制成浓溶液或吸附于少量填料上,然后上样,淋洗液靠毛细作用从柱上流下,使样品组分逐渐分开,在接近柱底部时,停止洗脱,将吸附剂按柱上的色带切割开,分别用合适的溶剂洗出。干柱色谱法所需时间短(15~30min),且消耗溶剂少,可用于天然产物的分离。
  减压液相色谱 vacuum liquid chromatography  利用抽真空减压的方式加速淋洗剂流动的液相色谱法。常用于天然产物(如中药有效成分)的制备。在装有填料的玻璃柱后连接一个减压装置(真空泵) 来提高淋洗液流速。
  大环化合物色谱 large ring compound chromatography  以大环化合物作固定相的液相色谱法。通常是将冠醚、环糊精等大环化合物键合或包覆在适当的固体基质上作固定相。
  金属氧化物固定相 metal oxides stationary phase  固定相填料为未经修饰的或进行了表面处理(修饰或改性)的金属氧化物微粒(微粉)。常用的金属氧化物固定相有氧化铝、氧化锆、氧化钛等,有的用作吸附剂,也有的用作离子交换剂。
  旋转小室逆流色谱 rotational little-chamber counter-current chromatography, RLCC  用中心有一小孔的聚四氟乙烯园盘将分离柱管分隔成若干连通的小空间,再将若干根这样的柱管排列在圆形转盘架上,柱管之间用聚四氟乙烯管串联起来。溶剂通过旋转密封接头进出这组分离柱管。所有柱管以一定的转速和倾角绕转盘中心轴转动。流动相进入第一个小室后,就会取代其中原已注满的固定相的位置,直到流动相液面达到圆盘上小孔的水平时,流动相就会穿过小孔进入下一个小室,并依次从一根柱管进入另一根柱管。随着流动相逐步穿过各个小室,带动样品在各个小室的两相间分配。柱管的转动是为了加速两相间的交换和接触。?参见“逆流色谱法”
  贯注色谱填料 perfusion chromatography packing  又称流通粒子,是一种经特殊设计,颗粒内部同时具有大小两种尺寸的孔。大孔是600~800nm的“贯通孔”,小孔是80~150nm的“扩散孔”,贯通孔的存在使流动相能快速地贯穿填料颗粒流动,从而加快填料内的传质过程,克服了全多孔硅胶填料孔径小的缺陷。
  灌注色谱法 perfusion chromatography  又称贯注色谱法或灌流色谱法,使用具有“贯通孔”的填料使流动相快速地贯穿填料颗粒流动,从而加快填料内传质过程的液相色谱方法。填料颗粒上的“贯通孔”直径在600~800nm,颗粒内的液体可将溶质对流传送到颗粒内部的固定相上,其传输溶质的速度要比普通液相色谱的扩散传输快1个数量级。灌注色谱只改变了流动相在填料中的流动性质,并不改变溶质与固定相的作用机理,因此任何一种分离模式的液相色谱都可通过制备其贯穿填料来提高传质效率。灌注色谱在生物样品的分离与制备领域已得到成功应用。
  萃取色谱法 extraction chromatography  固定相为具有配位或螯合能力的有机液体或有机溶液,而流动相为水溶液,分离过程中离子性溶质因与固定相中配位或螯合基团的作用由水相(流动相)转移到有机相(固定相),伴随配合物的形成及溶剂化作用等化学过程的色谱方法。萃取色谱是配合物液液分配色谱的一种特殊形式。
  场流分离 field-flow fractionation  又称单相色谱法,利用物理场使溶质在流经一个空的柱槽时,因质量、体积、扩散系数、电荷等物理性质的差异而被分离的方法。场流分离不需要填料,不存在固定相,其分离机理有别于一般的色谱分离技术。它适合于分离和测定大分子化合物、胶体和颗粒样品。
  生物色谱 biological chromatography  碳水化合物、蛋白质、酶、肽类、核苷核酸等生物大分子的色谱分离制备技术。与采用常规色谱方法所分离的物质不同,待分离的生物聚合体样品分子量较大、在自然界通常呈离子状态、兼具亲水性和疏水性、易失活、与固定相表面产生非专一性的相互作用。因此,生物色谱所采用的固定相和色谱分离条件需考虑生物样品的特殊性。
  碳分子筛 carbon molecular sieve  用碳材料制备的分子筛。在凝胶色谱(分子筛色谱)中用作固定相。
  薄壳型微珠载体 pellicular microbead support  以刚性的固体惰性微珠(如玻璃微珠)作基质,在其表面覆盖一层对色谱分离起实质作用的功能物质后所形成的色谱填料。这种填料的传质速度快、分离效率高,是高效液相色谱中一类新型填料。
  柱寿命 column life  在正常使用条件下,色谱柱的最大使用时间。柱寿命除了与色谱填料本身的性质相关外,在很大程度上取决于使用条件、样品性质和保养维护。另外,判断色谱柱是否已到使用寿命也没有一定之规。一般而言,原本分离很好的组分不能分离或色谱峰形状失常(分叉、严重不对称等等),则认为使用寿命已到。
  柱老化 column ageing  色谱柱使用一定时间后,分离性能显著下降的现象。老化是填料性质随使用时间慢慢衰退的过程,与使用不当造成的突然损坏不同。
  高速逆流色谱法 high speed counter-current chromatography, HSCCC  分离柱管不仅绕仪器中轴线公转,而且还绕自身轴线自转的一种高速高效的逆流色谱法。自转与公转同时进行使两溶剂相剧烈混扰、反复混合和分层,其分配转移的频率高达每秒十多次,对溶质的分配分离非常有利。
  分子筛色谱 molecular sieve chromatography  又称凝胶色谱,是以分子筛材料作固定相,利用不同大小的分子向筛孔内扩散的程度不同,将溶质按分子量大小进行分离的液相色谱方法。参见“凝胶色谱法”
  逆流色谱法 counter-current chromatography, CCC  基于样品在两个互不相溶的溶剂之间的分配作用的液相色谱技术。它的原理和液-液萃取分离相似,只不过液-液萃取是通过有限的几次不连续萃取操作,使分配系数相差较大的两个组分相互分离,而逆流色谱则通过适当的仪器进行复杂的机械运动使两互不混溶的液相作相对移动,而分配系数相差甚微的样品组分在连续的萃取过程中达到分离。逆流色谱在天然产物分离与制备领域应用较多。
  填充柱 packed column  在不锈钢柱管或石英毛细管中填充色谱填料的分离柱。液相色谱中使用的都是填充柱。与之对应的是气相色谱中最常用的开管柱(非填充毛细管柱)。
  制备色谱 preparative chromatography  指以获得一定量某个(或某类)物质纯样品为目的的液相色谱方法。根据制备量的大小选择适当的色谱条件(柱尺寸、流动相流速等)。实验室规模(mg至g级)的制备通常采用内径20~30mm的制备柱,流动相流速大约在20~30mL/min。通常是先用简单的分离方法(如溶剂萃取)进行初步分离纯化后再采用制备色谱进一步分离纯化。
  液滴逆流色谱 drop counter-current chromatography, DCCC  一个轻的与管壁表面的亲和力弱的液相在通过重的另一互不混溶的液相时,能观察到非常活跃的界面运动而形成离散的液滴,液滴作为流动相,连续不断地穿过作固定相的液相,从而有效地提供稳定的交换界面。DCCC的仪器是数百根相互连接的小孔径硅烷化玻璃管柱,柱管内充满液体固定相,流动相液滴连续穿过所有柱管,在理想的条件下,如果每个液滴在此体系中能保持一定的离散度,那么它就会形成一个塔板,样品在固定相和液滴之间反复分配使各组分相互分离。
  凝胶内体积  gel inner volume  凝胶色谱柱中填料孔隙内溶液的体积。
  凝胶外体积  gel interstitial volume  凝胶色谱柱中填料颗粒与颗粒之间的溶液体积,不包括填料孔隙内溶液的体积。
  排斥极限分子量 exclusion limit molecular weight  对特定的凝胶色谱柱而言,在该柱上完全被固定相排斥,在柱上无保留的溶质的最小分子量,即超过此分子量的溶质,因都不能进入填料表面的孔隙,都在死体积(排斥体积)处流出,相互之间无法分离。
  渗透极限分子量  permeation limit molecular weight  对特定的凝胶色谱柱而言,在该柱上完全不受孔体积的限制,能自由进出填料孔隙的溶质的最大分子量,即小于此分子量的溶质,因都能无束缚地进出填料表面的孔隙,都在相同的淋洗体积(渗透体积)处流出,相互之间无法分离。
  非水系凝胶色谱柱 non-aqua-system gel column  适用于非水系凝胶色谱(亲脂凝胶色谱或凝胶渗透色谱)分离的色谱柱。因为非水系凝胶色谱使用的流动相是可以溶解非凝胶状聚乙烯等合成高分子化合物的有机溶剂,因此,其固定相是不被这样的有机溶剂所溶解的多孔性凝胶状聚乙烯微粒。
  水系凝胶色谱柱 aqua-system gel column  适用于水系凝胶色谱(亲水凝胶色谱或凝胶过滤色谱)分离的色谱柱。因为水系凝胶色谱使用的流动相是水或缓冲溶液,所以,要求固定相应该与流动相具有一定亲和性。水系凝胶填料通常是将水溶性聚合物交联后的凝胶微粒,这种填料适合于水溶性合成高分子或天然高分子的分离。
  软(质)凝胶 soft gel  指机械强度较低、不耐高压的凝胶填料。常见软凝胶有交联葡聚糖、天然琼脂糖和合成的交联聚丙烯胺等,它们在有机溶剂中产生溶胀,只适合于水和较强极性的有机溶剂(如甲醇、乙醇等低级醇)体系。
  数均分子量 number mean molecular weight  又称加权算术平均分子量,在液相色谱法(凝胶色谱法)中是指对高分子聚合物中不同分子量的个数进行加权平均后得到的聚合物分子量的表征值。如由10个分子量为100和5个分子量为1000 的混合物的数均分子量为:
  重均分子量 weight mean molecular weight  在液相色谱法(凝胶色谱法)中是指对高分子聚合物中不同分子量进行个数和重量加权平均后得到的聚合物分子量的表征值。如由10个分子量为100和5个分子量为1000 的混合物的重均分子量为:
  多分散度 polydispersity  又称分布宽度指数,是重均分子量与数均分子量之比。
  分子量分布 molecular weight distribution  高分子聚合物中不同分子量的同系物所占的重量和数量。高分子聚合物的分子大小是不均一的,是由不同分子量的同系物组成的混合物,不同的分子量有一个分布,分布的形状则受各种聚合条件及聚合方式的影响。高分子聚合物的分子量分布状况可以用分子量分布曲线表示。
  流体力学体积 hydrodynamic volume  对某类高分子溶质而言,其众多分子在溶液中所占立体空间的平均体积。在凝胶色谱中,计算高分子化合物的分子尺寸时用到流体力学体积概念。
  固有粘度 intrinsic viscosity  又称极限粘度,是某一高分子特有的,与其溶液的浓度无关的粘度值。
  高温凝胶色谱法 high temperature gel chromatography  在高温条件下进行分离和检测的凝胶色谱法。用于在常温下不溶解的高分子样品的分析,通常是将凝胶色谱仪的进样器、色谱柱和检测器部分加热到150℃左右。
  光散射检测器 light scattering detector  利用物质微粒(包括分子)对光的散射作用进行分析的检测器。当某一波长的光照射在物质微粒上时,除一部分通过物质微粒或被微粒吸收外,大部分的光将以同样的波长向各个方向散射(瑞利散射),散射光的强度是微粒数量和微粒大小的函数。光散射检测器是凝胶色谱中常用的检测器之一。
  小角激光散射光度计 low-angle laser light scattering photometer, LALLS  以激光作光源,检测散射角度在5°左右的低角度散射光的光散射检测器。因为散射光强有角度和浓度依赖性,所以必须测定几个浓度和不同角度下的散射光强,从而得到外推值。而LALLS的特点是光束集中且准直性好,因此可测量小角度及较稀浓度下的散射光强,避免了角度和浓度外推的麻烦。它是凝胶色谱中较理想的分子量检测器。
  多角度激光光散射光度计 multi-angle laser light scattering photometer, MALLS  以激光作光源,对多个(如18个)角度的散射光同时进行检测的光散射检测器。小角激光光散射光度计虽然使用简单方便,但它只是一个角度的数据,不能得到高分子化合物的分子大小信息。MALLS则可获得分子大小的信息。
  粘度检测器 viscosity detector  凝胶色谱中常用的检测器之一,通常以玻璃或不锈钢毛细管粘度计作检测器。因为高分子溶液的粘度与其浓度相关,不同粘度的高分子溶液通过毛细管的时间和在毛细管中产生的压力降不同,通过测定柱流出物通过毛细管的时间或压力降就可以检测和定量高分子化合物。玻璃毛细管粘度计是通过其虹吸管间歇地吸取一定体积的柱流出物,测定其流经毛细管的时间。而不锈钢毛细管粘度计是通过其压力传感器,连续地测定柱流出物流经毛细管时的压力差。
  圆锥模型 conical model  在凝胶色谱(空间排阻色谱)中,将固定相上孔隙假想成圆锥状孔来讨论溶质分子保留机理的理论模型。它认为固定相表面的孔隙越往里孔径越小,比圆锥入口处直径还大的溶质分子不能进入孔中,快速流出色谱柱。在那些可以进入孔中的分子中,体积越小的分子到达圆锥孔中的深度越大,在固定相中的保留时间越长。
  圆筒模型 cylindrical model  在凝胶色谱(空间排阻色谱)中,将固定相上孔隙假想成圆筒状孔来讨论溶质分子保留机理的理论模型。它认为溶质分子能利用的孔体积是扣除从孔壁到相当于溶质分子半径的区域后剩下的空间,即分子半径大于孔隙半径的溶质不能进入孔中,即在死体积处最先流出色谱柱。显然,体积越小的分子,能利用的孔体积越大,在固定相中的保留时间也就越长。



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